2-[[2-إثوكسي-4- ((4-هيدروكسي-1-بيبيريديدينيل) فينيل]امينو]-5,11-ديهيدرو-5,11-ديميثيل-6H-بيريميدو[4,5-ب][1,4]البنزوديازيبين-6-

وصف المنتج:

اسم المنتج: 2-[[2-Ethoxy-4-(4-hydroxy-1-piperidinyl) phenyl]amino]-5,11-dihydro-5,11-dimethyl-6H-pyrimido[4,5-b][1,4]البنزوديازيبين-6-واحد CAS NO:1234480-50-2

مترادفات:

XMD 8-92 (القاعدة الحرة) ؛

6H-Pyrimido[4,5-b][1,4]البنزوديازيبين-6-واحد,2-[[2-ايتوكسي-4-(4-هيدروكسي-1-بيبيريدينيل)فينيل]امينو]-5,11-ديهيدرو-5,11-ديميثيل-؛

الخصائص الكيميائية والفيزيائية

مظهر: مسحوق أبيض إلى أبيض شبه

النتيجة: ≥98.0%

الكثافة:1.3 غرام/سم3

نقطة الغليان:741.8 درجة مئوية عند 760 ملم زئبق

نقطة الاندفاع:402.4 درجة مئوية

في الفيترو

يظهر XMD8-92 أكبر afinity نحو BMK1 مع ثابت الانفصال المقاس (Kd) من 80 nM ، في حين يعرض DCAMKL2 و TNK1 و PLK4 Kd ٪ من 190 و 890 و 600 nM ، على التوالي.يتم تحليل XMD8-92 ضد جميع الكينازات القابلة للكشف في الليزات الخلوية HeLa باستخدام طريقة KiNativ ويتم العثور على أنه أكثر انتقائية بنحو 10 أضعاف لـ BMK1 مع IC50 من 1.5 μM أكثر قوة من الأهداف غير المستهدفة ، TNK1 (IC50 = 10 μM) و ACK1 (المعروف أيضًا باسم TNK2 ، IC50 = 18 μM). تشمل الأهداف غير المستهدفة الضعيفة الأخرى نطاق الكينازة 2 من RSK1 و RSK2 ، PIK4A و PIK4B و FAK.لا يتم تثبيط MEK5 بشكل ملحوظ بواسطة XMD8-92 عند 50 ميكرومتر [1]يظهر XMD8-92 انتقاءً عالياً لـ BMK1 في اختبار التنافس على موقع ATP في المختبر ضد 402 كيناز وكذلك في طريقة KiNativ ضد جميع الكينازات القابلة للكشف في الليزات الخلوية HeLa.يمنع XMD8-92 تنشيط BMK1 الذي تسببه EGF مع IC50 من 240 nM و، مع تركيز يصل إلى 5 ميكرومترات ، XMD8-92 ليس له تأثير مثبط على تنشيط ERK1/2 بواسطة EGF [2].

في فيفو

يمنع XMD8-92 نمو الورم بشكل كبير في الحيوية بنسبة 95٪. تم تقييم صناعة الدواء لـ XMD8-92 في جرذات Sprague-Dawley التي تم إعطائها جرعة واحدة عن طريق الوريد أو عن طريق الفم. تم العثور على XMD8-92 بـ 2.0 ساعة نصف الحياة الإزالة من 26 مل / دقيقة / كجم. يمتلك XMD8-92 توزيعًا معتدلًا في الأنسجة بحجم توزيع مُحسب قدره 3.4 لتر/ كجم.بعد تناول جرعة واحدة عن طريق الفم من 2 ملغ/ كجمفي تجارب التسامح، تمت ملاحظة تركيزات بلازما أقصاها تبلغ حوالي 500 نيمتر بعد 30 دقيقة، مع بقاء 34 نيمتر بعد 8 ساعات من الجرعة.يتم الحفاظ على تركيزات البلازما العالية للدواء (حوالي 10 ميكرو ميتر بعد جرعة IP من 50 ملغ / كجم) طوال 14 يومًا.. يبدو أن XMD8-92 يتم تحمله بشكل جيد ويبدو أن الفئران بصحة جيدة دون أي علامة على الضيق. لم يتم ملاحظة عدم استقرار الأوعية الدموية في الفئران المعالجة بـ XMD8-92 [1].حجب علاج XMD8-92 في كل من الفئران المعنية بالجهاز المناعي والعجز المناعي من نمو أورام الزرع الأجنبي الرئوي، بنسبة 95% على التوالي. This remarkable anti-tumor effect of XMD8-92 in lung and cervical xenograft tumor models is due to XMD8-92’s capacity to inhibit tumor cell proliferation through the PML suppression-inducted p21 checkpoint protein، ومن خلال منع مساهمة BMK1 ‬ في تولد الأوعية المرتبطة بالورم. بالإضافة إلى ذلك ، يؤدي ضربة BMK1 (KO) في الفئران إلى إزالة البروتين BMK1 بشكل كامل وغير قابل للإنعكاس.في حين أن علاج XMD8-92 في الفئران يقلل فقط من نشاط BMK1ثانياً، عدم استقرار الأوعية الدموية الملاحظ في فأر BMK1 KO قد يكون بسبب عدم وجود نطاق غير كينازي في طرف C من BMK1،التي لا تزال موجودة أثناء علاج الحيوانات XMD8-92 [2].

تحليل الكينازة

يتم تحديد ملفات KiNativ لـ XMD8-92 مع كل من ATP و ADP acylphosphate- desthiobiotin مع التعديلات التالية.تُحَرَّكَ خليّات HeLa الخضراء (5 mg/mL من البروتين الكلي) في وجود XMD8-92 عند 50 ميكرومتر.، 10 ميكروميتر، 2 ميكروميتر، 0.8 ميكروميتر، و 0 ميكروميتر لمدة 15 دقيقة قبل إضافة مسبار ATP أو ADP acylphosphate (تركيز المسبار النهائي 5 ميكروميتر). يتم إجراء جميع التفاعلات في نسخة مزدوجة.تم إجراء ردود الفعل في المسبار لمدة 10 دقائق وتم إيقاف التفاعل بإضافة اليوريا ومعالجتها لتحليل التصلب المتعدد. Samples are analyzed by LC-MS/MS on a linear ion trap mass spectrometer using a time segmented “target list” designed to collect MS/MS spectra from all kinase peptide-probe conjugates that can be detected in HeLa cell lysatesيتم إنشاء هذه القائمة المستهدفة والتحقق من صحتها من خلال تحليل شامل مسبق لـ HeLa lysates.يتم استخدام ما يصل إلى أربعة أيونات مكونة من أجزاء مميزة لكل كيناز بيبتيد-مسبار مكافئ لاستخراج الإشارات لكل كيناز، ومقارنة من المثبط المعالجة لمراقبة (غير المعالجة) الليزات تسمح لتحديد دقيق من % من التثبيط في كل نقطة.يتم إعداد مخطوطة تصف تفاصيل هذا النهج المستهدف لمقياس الكتلة [1].

إدارة الحيوانات

الفئران [1] يتم إعادة تعليق خلايا 5 × 105 هيللا في DMEM وتحقينها تحت الجلد في الجناح الأيمن للفئران Nod / Scid البالغة من العمر 6 أسابيع (اليوم 0). في اليوم الثاني (اليوم 1) بعد حقن الخلايا الورمية ، يتم حقن الخلايا في الجناح الأيمن للفئران Nod / Scid البالغة من العمر 6 أسابيع.تم تقسيم الفئران عشوائياً إلى مجموعتين (6 حيوانات)، XMD8-92 ، 1-28 يوم ، و 18 حيوان ، مراقبة) ، يتم علاج مجموعة XMD8-92 (1-28 يوم) بـ XMD8-92 بجرعة 50 ملغ / كجم مرتين يوميًا داخل الحلق.تتلقى المجموعة المراقبة حقن يومية من محلول الناقل كمركز مراقبةفي اليوم السابع ، يتم تقسيم مجموعة التحكم عشوائياً إلى مجموعتين (حيوانات 6 ، XMD8-92 ، يوم 7-28 ، و 12 حيوان ، التحكم) ، وفي اليوم 14 ،يتم تقسيم مجموعة التحكم المتبقية عشوائياً إلى مجموعتين (6 حيوانات)(XMD8-92 في 7 - 28 يوماً) و (XMD8-92 في 14 - 28 يوماً) ، و 6 حيوانات، والتحكم) يبدأ العلاج بـ XMD8-92 في مجموعات XMD8-92 (7 - 28 يوماً) و XMD8-92 (14-28 يوماً) في اليوم 7 و اليوم 14 على التوالي.يتم قياس حجم الورم باستخدام عدادة، ويتم تحديد حجم الورم [1].

المراجع:

[1] يانغ كيو، وآخرون. يمنع التثبيط الصيدلاني لـ BMK1 نمو الورم من خلال بروتين سرطان الدم البروميولوسيتي. خلية السرطان. 2010 سبتمبر 14;18 ((3):258-67.

[2] يانغ Q، et al. استهداف مسار كيناز BMK1 MAP في علاج السرطان.

[3] Umapathy G، et al. الحركية ALK تحفز الحركية ERK5 لتعزيز التعبير عن MYCN الأوكوجين في سرطان الخلايا العصبية. Sci Signal. 2014 Oct 28;7 ((349):ra102.

إذا كنت مهتمًا بمنتجاتنا أو لديك أي أسئلة ، يرجى الشعور بالحرية في الاتصال بنا!

يتم تقديم المنتجات تحت براءة الاختراع فقط لأغراض البحث والتطوير. ومع ذلك، فإن المسؤولية النهائية تقع حصرا على عاتق المشتري.